植物dna的提取为什么（植物dna的提取为什么加液氮）
碱煮法提取植物dna的原理 碱煮法提取植物DNA的原理是：高PH的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。 拓展资料： 将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。 尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。只要用碱处理的强度和时间不要太过，当pH值恢复到中性时，DNA双链就会再次形成。 在裂解过程中，细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体DNA会相互缠绕成大型复合物，后者被十二烷基硫酸盐包盖。当用K+取代Na+时，复合物会从溶液中有效地沉淀下来，离心除去变性剂后，就可以从上清中回收复性的质粒DNA。 植物dna提取的原理和方法？其中乙醇和氯仿一异成醇各起什么作用 植物DNA提取方法是采用CTAB法。 CTAB，是一种阳离子去污剂,能与核酸形成复合物,此复合物在高盐(0.7mol/L) 浓度下可溶,并稳定存在,但在低盐浓度(0.1～0.5mol/L NaCl)下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。经离心弃上清后,CTAB-核酸复合物再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB。 无水乙醇：沉淀DNA。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。 氯仿：克服酚的缺点；加速有机相与液相分层。 异戊醇：减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。 为什么用菠菜提取DNA因为菠菜随处可见，所以提取植物DNA经常使用的是菠菜。 提取植物DNA是植物基因工程的重要实验之一，植物DNA基因组包括细胞核DNA和细胞器DNA，两者统称为总DNA，除此之外也包括需要构建载体时候需要提取质粒DNA。植物DNA就是植物的遗传物质，能够进行传递，并保持整个物种不变的物质，也称为基因，DNA的中文名字是脱氧核糖核苷酸。所以提取植物DNA不仅仅是用菠菜，还会用到很多很多植物，每个植物的DNA都不相同，只有多实验，多对比，才能得出实验结论。 植物dna提取浓度低原因DNA提取浓度低可能有以下原因 1)实验材料量太少，建议适当增加增加样本量； 2)样品裂解不充分。保持样本量不变的情况适当增加裂解液。使用液氮或匀浆器对样品进行研磨和匀浆，使其充分混匀，适当延长裂解时间； 3)提取材料质量不好。保证样品本身DNA含量，尽量选用富含核酸的组织或新鲜组织提取基因组DNA，样品采集后应尽快保存在 -80℃或液氮中，避免样品反复冻融或保存时间过久。若样品DNA含量较少，即使电泳检测不到明显的DNA条带，仍可尝试进行PCR检测，建议使用灵敏度高的酶进行扩增； 4)洗脱条件不合适。用超纯水洗脱前应检查其pH 值是否在7.0-8.5之间，如pH值小于7将明显影响洗脱效率，需调节后进行洗脱； 5)裂解液中加入无水乙醇后有沉淀析出。用移液枪吸打几次打散沉淀有利于提高产量。 6）DNA 断裂或降解。避免因移液枪反复吹吸或反复冻融样品造成的DNA损伤，及避免在操作过程中带入外源DNase污染 |